Гексамитоз — заболевания аквариумных рыб

Введение

Не вдаваясь в детали строения клетки Дипломонад (с которыми читатель может ознакомиться самостоятельно — Poynton, Sterud, 2002), отмечу интересные моменты, затронутые авторами данной статьи: — определение вида Дипломонад (Diplomonadina), семейства Hexamitidae невозможно без изучения ультраструктурных особенностей клетки. Необходима просвечивающая электронная микроскопия (TEM); — все современные работы с использованием технологии TEM обнаружили у рыб жгутиконосцев рода Spironucleus, но не Hexamita. Т.е. подтверждены случаи заражения рыб только представителями рода Spironucleus.

Жгутиконосцы Дипломонад, приготовленные различными техниками и рассматриваемые под световым микроскопом.

Рисунок. Жгутиконосцы Дипломонад, приготовленные различными техниками и рассматриваемые под световым микроскопом. (a,b) Свежие образцы сферического и удлиненного трофозоита Spironucleus torosa (интерференционный микроскоп Номарского); (c,d) сырые препараты Spironucleus torosa, окрашенные Протарголом (препарат коллоидного серебра, протеиновое серебро), отмечены V-образная структура на заднем конце клетки [на TEM снимке изображены в виде двух колец микротрубочек, поддерживающих выступ около тела, рекуррентные жгутики проходят около центра клетки]; (e) препарат Spironucleus torosa, окрашенный Протарголом (препарат коллоидного серебра, протеиновое серебро) по методу с фильтрацией, отмечена темная область на заднем конце тела (на TEM снимке изображены как обширная симметричная система микротрубочек, поддерживаемая удлиненной конструкцией пересекающихся ребер на заднем конце тела), бугорок, прохождение рекуррентных жгутиков под поверхностью клетки; (f) неопределенный вид Дипломонад (стрелки) в мазке крови, окрашенном по Лейшман-Гимза, видны ядро и путь рекуррентных жгутиков через клетку; (g) культура S. barkhanus, окрашенные 4?-6-диамино-2-фенилиндолом (DAPI), наблюдение под световым полем и УФ-излучением, ядро выглядит сине-фиолетовым (белое на фотографии); (h) Spironucleus torosa в срезах ткани (полость прямой кишки), окрашенная по Фельгену (реакция Фельгену); (i) Spironucleus torosa в срезах ткани (полость прямой кишки), окрашенная гематоксилином-эозином. Аббревиатуры: (cp) каудальная проекция; (p) бугорок; v – V-образная структура на заднем конце тела (масштаб = 10 мкм).

Среда обитания

Одноклеточные жгутиконосцы могут жить в окружающей среде, особенно, в загрязненной воде и осадке, либо быть паразитами беспозвоночных (моллюсков, ракообразных), рыб, амфибий, птиц, мышей и других млекопитающих. Их основной функцией в среде обитания является переваривание бактерий для получения питательных веществ.

Наиболее известные дипломонады это Лямблии (Giardia), которые чаще всего выступают первопричиной диареи у людей по всему миру. Этот организм также может привести к смерти маленького ребенка или людей с иммунодефицитом. Паразит прикрепляется к верхней стенке кишечника и, размножаясь, начинает выделяться с фекалиями. Он устойчив к дезинфицирующим средствам, например, хлору в плавательном бассейне. Цисты длительное время сохраняются в воде, и проглатывание даже их небольшого числа приводит заражению. У рыб аналогичным образом происходит заражения другим жгутиконосцем Spironucleus. Он инфицирует Арктического гольца, форель, дикую и культурную рыбу, других тропические аквариумные виды, мышей и птиц.

Успешный контроль инфекции зависит от понимания биохимических различий между возбудителем и его хозяином, в частности, формирования стенки цист. Дипломонады предпочитают среду с низким содержанием кислорода, они слабо защищены от воздействия воздуха. Таким образом, введение окислителей (озона, активного форм хлора, перекисей) в воду поможет бороться с ними [Lloyd, Williams, 2014].

Причины появления болезни

Большинство аквариумистов считают, что гексамитоз рыб в аквариуме развивается вследствие несоблюдения элементарных условий ухода за искусственным водоемом и его обитателями. К которым относят:

• применение некачественного или испорченного корма;
• нечастое или избыточное кормление;
• нехватку минералов или авитаминоз у рыбок, что приводит к понижению их иммунной системы.

Но как показывают многочисленные исследование, все вышеперечисленные причины важны, но они являются лишь вспомогательными факторами, которые только провоцируют развитие этого заболевания, при этом никоим образом его не вызывая.

Так, возбудители этого недуга оказываются в общем аквариуме одновременно с грунтом, некачественной едой и даже водой или растительностью. После этого жгутиковый паразит ничем не выдает своего присутствия до того времени, пока в искусственном водоеме не создаются оптимальные для него условия. Далее начинается активный процесс его деления, активизируя тем самым заболевание. Результаты активной фазы уже можно будет увидеть невооруженным взглядом. Стоит особенно подчеркнуть, что не вовремя начатое лечение зараженных рыб, может привести к их гибели.

Также, некоторые ученные утверждают, что возбудители этого заболевания присутствуют практически в каждой рыбе в аквариуме. А особенно в мальках или молодых рыбках.

Интересен тот факт, что один раз переболев этим недугом, такая рыбка получает пожизненный иммунитет от гексамитоза. Это в первую очередь говорит о том, что лечение проводилось правильно и организм больного смог выработать необходимые антитела. Помните, что гексамитоз несет опасность не только заболевшим рыбкам, но и из-за того, что возбудители заболевания образовывают цисты, выходящие вместе с ее экскрементами, существует высокая вероятность развития настоящей эпидемии в аквариуме.

Заражение и распространение гексамитоза

Возбудитель гексамитоза инфицирует диких и культурных рыб, в том числе, аквариумных цихлид (дискусов, скалярий, астронотусов). Паразит селится в начале кишечника, сразу после желудка.

Скорее всего, жгутиконосцы переносятся горизонтально. Цисты или трофозоиты (вегетативная стадия развития) попадают в организм с водой, загрязненной фекалиями. Жгутики позволяют паразиту достигать верхнего отдела кишечника. В кишечном тракте дипломонады свободно перемещаются в просвете и каловых массах.

Время генерации жгутиконосца составляет 24 часа. С кровью паразит проникает в другие части организма, и его популяция возрастает.

Помимо заражения внутренних органов, не исключается заражение покровов тела, появление язв и эрозя боковой линии.

Среди пресноводных аквариумных рыб особенно восприимчивы к возбудителю гексамитоза Окунеобразные (цихлиды). Реже заболевают Карповые – кои и золотые рыбки.

Стоит отметить, что в норме возбудитель гексамитоза часто в незначительном количестве обнаруживается в рыбе. Основываясь на доступных данных, можно предположить, что S. vortens, признанный возбудитель гексамитоза цихлид, находится в промежуточном положении между организмом комменсалом и оппортунистическим паразитом. Например, здоровые скалярии часто имеют в кишечнике этого патогена, однако системная инфекция не развивается. Более того, в язвах при дырочной болезни часто находятся бактерии. Т.е. жгутиконосцы могут опосредованно скапливаться в язвах, питаясь этими бактериями, а не вызывать возникновение самих повреждений [www.biomedcentral.com/1471-2180/8/71].

Профилактика гексамитоза

Паразит может появиться в аквариуме с растениями, кормом, на других рыбках. При появлении паразита самые восприимчивые рыбки заболеют гексамитозом. Чтобы избежать появления паразитов и распространения гексамитоза в общем аквариуме, рекомендуется позаботиться о превентивных мерах:

• поддерживать в аквариуме оптимальную биосреду;
• регулярно делать подмены воды и чистить резервуар;
• кормить специализированными неиспорченными кормами;
• периодически давать аквариумным рыбкам лекарственные корма против паразитов;
• не перекармливать рыбок;
• следить за уровнем аммиачных и нитратных соединений в воде.

Гексамитоз может стать причиной вымирания всех рыб в общем аквариуме, если вовремя не распознать болезнь, не начать с ней бороться. Побороть болезнь не составит труда, если начать болезнь своевременно. Следите за чистотой аквариума, отсаживайте новых рыбок на двухнедельный карантин, хорошо промывайте грунт, растения – простые профилактические меры сохранят здоровье аквариума и его обитателей.

Симптомы гексамитоза

К заражению наиболее восприимчивы слабые и находящиеся в стрессе особи. При гексамитозе рыба теряет аппетит и вес. Она забивается в укромные места, прекращает нормально передвигаться. Окраска темнеет, голова становится светлее остальной части тела. Часто, вследствие истощения, голова рыбы выглядит крупнее её тела (так называемая, рыба «булавочная головка»).

Внешние проявления гексамитоза у астронотуса (Astronotus ocellatus) (mishka, www.oscarfishlover.com/forum)

Проявления гексамитоза у цихлиды Фловерн Хорна (Alamy, practicalfishkeeping.co.uk)

Внешние проявления болезни именуются «дырчатой болезнью». Из жабр, рта, язв, головы и ануса рыбы выделяется беловатая слизь. Спустя 48 часов, глаза обволакиваются беловатым налетом. Через несколько дней особи с катарактой теряют зрение. На конечной стадии течения гексамитоза рыбы сталкиваются с недостатком кислорода, их жабры наполнены кровью так, что перенос кислорода в другие части тела затруднен. Особи плавают к поверхности воды, а затем возвращаются на дно. Перемещения нескоординированы.

Спустя 14-16 дней, в отсутствие лечения, заболевшие обычно погибают. На всех стадиях гексамитоза зараженные особи выделяют паразитов в воду и распространяют инфекцию. По этой причине рыбоводу необходимо мыть руки после работы с больными.

Возможно хроническое течение гексамитоза. Оно часто отмечается у культурной рыбы весной и осенью. Смертность среди них слегка выше, чем у здоровых рыб, однако из-за длительного периода культивирования потери могут быть существенными [Tojo, Santamarina, 1998].

Профилактика

Чтобы обезопасить жителей аквариума от риска заболеть этой непростой болезнью нужен правильный уход с целью профилактики. Кормить рыбок нужно специальными лечебными кормами, в состав которых входит спирулина, канамицин и фуразолидон. Обитателям аквариума нужно обеспечить полноценное и качественное питание. Также нужно контролировать качество воды. Полезно добавлять в общий аквариум Fishtamin либо Activant.

Дырочная болезнь, к сожалению, нередкое явление. Именно поэтому не следует опускать руки при ее возникновении. Необходимо набраться терпения и приступать к лечению. За помощью можно обратиться к ветеринарам либо опытным аквариумистам. Действенных методов лечения предостаточно.

Диагностика

Точная диагностика гексамитоза проводится посредством микроскопического исследования давленых препаратов кишечника (увеличение 200-400х), либо фекалий. Жгутиконосцы двигаются быстро и беспорядочно. Их легко заметить в области отслоения слизистой оболочки и при серьезном заражении [Sahandi, Hajimoradloo, 2011].

У живых особей после проведения наркотизации, легким надавливанием на брюшко, выдавливают каловые массы из кишечника. Образец наносят на предметное стекло и добавляют три капли воды. Накрывают покровным стеклом и рассматривают под микроскопом (400х).

Степень инвазии паразита может быть оценена по следующей шкале [Tojo, Santamarina, 1998]: Ноль (-) — на площади стекла 24х32 мм отсутствует возбудитель гексамитоза; Минимальная (+/-) — на площади стекла 24х32 мм обнаружен только один паразит; Низкая (+) — обнаружено более одного паразита во всем препарате (24х32 мм), в поле микроскопирования менее 10 особей; Умеренная (++) – в поле микроскопирования 10-50 особей; Высокая (+++) — в поле микроскопирования >50 особей

Аутопсия

У мертвых рыб берут область кишечника сразу после желудка. У больных особей этот отдел имеет ярко-желтую окраску (из-за выделения желчи). Готовят давленые препараты кишечника и рассматривают под микроскопом.

Плавники рыб темные и в основании имеют кровоизлияния. Чешуя покрыта беловатой, желтоватой слизью. Заражению подвергаются кишечник, печень, селезенка, плавательный пузырь, сердце, кожа и плавники. Однако гистологические изменения во внутренних органах отмечаются лишь у некоторых видов. Так у скалярий образуются гранулемы в печени, происходит инфильтрация макрофагов в селезенке и лимфоцитов в кишечнике. У астронотусов и мбун этого не наблюдается .

Перед смертью происходят многочисленные внутренние кровоизлияния.

Ткань печени (1), селезенки (2) и кишечника (3) скалярии, зараженной гексамитозом. Окрашивание гематоксилином и эозином. Масштаб 50 и 100 мкм. Gr — гранулема, M — макрофаги, * — область воспаления, инфильтрат лимфоцитов и подслизистая оболочка в кишечнике (Suchanya Mankhakhet et al., 2012)

Для идентификации возбудителя гексамитоза при аутопсии кишечника, рекомендуется предварительно оставить рыб без корма.

Стоит отметить, что у рыбок, тяжело пораженных возбудителем гексамитоза (многочисленные паразиты в пилорическом привратнике желудка и кишечнике), по-прежнему могут отсутствовать повреждения слизистого покрова кожи и внешние признаки инвазии в эпителий [Tojo, Santamarina, 1998].

Описание и общие сведения

Гексамитоз или дырочная болезнь также известна под названиями октомитоз и спиронуклеоз. Научное название этой болезни — Hexamita (Octomitus) truttae. Возбудителем этой нередкой болезни аквариумных рыбок является одноклеточный паразит жгутиконосец. Размножается делением и делает это быстро даже в неактивном состоянии. Он поселяется в теле рыбки и оставляет на нем ямки, дырки и борозды, которые имеют белый цвет. Чаще всего он поражает кожу с боков на теле рыбки и голову. Гексамитоз выводится из организмы вместе с отходами жизнедеятельности, поэтому в аквариуме распространяется довольно быстро и сам не исчезнет, даже если условия в аквариуме идеальные.

Гексамитоз у цихлид и других видов рыб

На фото гексамитоз у скалярии (Pterophyllum scalare) (advancedaquariumconcepts.com/hole-in-the-head-discus-oscars.html)
Получены достоверные результаты заражения скалярий, астронотусов и мбуны видом Spironucleus vortens. Удалось получить культуру паразита у скалярии. В свежем препарате он был активен и быстро крутился вокруг продольной оси. Трофозоиты имели грушевидную, овальную форму, 9.0-16.0 мкм (среднее 12.86 мкм) в длину и 3.0-10.0 мкм (среднее 6.52 мкм) в ширину. Они несли S-образное ядро и 8 жгутиков (6 передних и 2 задних) .

Искусственное заражение скалярий гексамитозом приводило к гибели 13.33-86.67% особей в течение 14 дней. Клинические проявления болезни были схожи с аналогичным заболеванием диких особей, однако некоторые аквариумные экземпляры умирали без каких-либо клинических симптомов.

В экспериментах с искусственным заражением гуппи, меченосцев, золотой рыбки и пецилий продемонстрирована устойчивость этих видов к Spironucleus vortens. У петушков (Betta splenders) возбудитель гексамитоза не обнаружен .

В другой работе было показано, что гексамитоз северумов, скалярий, нильской тиляпии также вызывают жгутиконосцы вида Spironucleus vortens. Паразит был выделен из почек, печени, селезенки и язв на голове рыб [Paull, Matthews, 2001].

С другой стороны, холодноводные культурные рыбы, Атлантический лосось, Арктический голец страдают от вида Spironucleus barkhanus [Guo, Woo, 2004], а радужная форель – от вида Spironucleus salmonis . Течение гексамитоза у них имеет две фазы – кровяную и тканевую.

Таким образом, возбудители гексамитоза многочисленны и демонстрируют четкую видовую специфичность к хозяевам.

Как лечить гексамитоз рыб

Больную рыбку рекомендуется сразу пересадить в отдельный резервуар. В емкости должна быть подготовлена вода, лучше взять воду из аквариума, чтобы больная рыбка не ослабла из-за изменения условий.

После пересадки температуру в карантиннике повышают до 33 градусов. Но эту процедуру нужно выполнять с осторожностью, так как не все рыбки смогут перенести такое увеличение температуры. Высокая температура убивает паразитов.

Больных рыбок лечат метронидазолом. Второе название – трихопол. Это противопаразитарное средство, которое не влияет на биосреду и не вызывает побочных реакций. Трихопол добавляют в общий аквариум, при этом отсаживать больную рыбку при терапии метронидазолом необязательно. Чтобы убить паразитов, нужно добавлять 250 мг препарата на 35 литров воды. Лечение метронидазолом продолжается в течение 3 дней, иногда требуется неделя. Ежедневно делают около 25% подмены воды. При снижении аппетита у аквариумных жителей нужно остановить лечение рыб метронидазолом. Через 7 дней специалисты рекомендуют повторить курс метронидазолом, чтобы окончательно убить остатки паразитов.

В зоомагазинах продаются специальные средства для борьбы с разными паразитами. Можно узнать у специалиста, какое средство поможет вылечить гексамитоз.

Если использование лекарственных средств привело к отравлению водных жителей, нужно поменять около 40% воды в аквариуме. Лечение гексамитоза не прекращают, но рекомендуемую дозировку понижают в два раза.

Сколько проводить лечение, зависит от степени распространения заболевания и тяжести течения. Если лечение проводится в карантиннике, после возвращения их в общий резервуар необходимо использовать препарат для профилактики еще 4 дня.